Jawatan Popular

Pilihan Editor - 2019

Alternatif yang cepat untuk ujian keselamatan standard untuk vektor lentiviral

Anonim

Ujian yang baru dan terbuka untuk menilai keselamatan produk terapi sel yang diubah oleh lentivirus menjana hasil dalam masa beberapa jam, berpotensi untuk mempercepatkan kadar imunoterap virus bergerak ke percubaan klinikal. Pemeriksaan semasa yang diperlukan oleh Pentadbiran Makanan dan Ubat-ubatan AS mengambil masa kira-kira enam minggu untuk disiapkan. Ujian pesat, yang tidak mempunyai risiko positif yang positif, juga merupakan sebahagian kecil daripada kos pendekatan standard. Kerja ini muncul pada 21 September dalam jurnal Terapi Molekul - Kaedah & Pembangunan Klinikal .

iklan


"Ramai orang mengelakkan teknologi ini untuk ujian pantas kerana ia mempunyai potensi untuk positif palsu, tetapi saya fikir kami telah membuktikan bahawa ia sangat mungkin untuk mempunyai sensitiviti tinggi dan ketepatan tinggi dengan ujian ini, " kata pengarang senior David DiGiusto, Eksekutif Pengarah Stem Sel dan Operasi Terapeutik Selular di Sekolah Perubatan Universiti Stanford. "Kaedah ini agak mudah, dan mana-mana makmal yang menggunakan vektor lentiviral sepatutnya mempertimbangkan untuk menjalankannya pada produk sel transduced lentiviral mereka untuk mendokumentasikan kekurangan virus yang dapat dikesan-replikasi yang dikesan."

Lentivirus adalah sejenis retrovirus yang biasa digunakan oleh syarikat untuk memperkenalkan gen baru ke dalam sel-sel CAR-T terapeutik (sel T penerima antigen chimeric), yang diperkenalkan kembali kepada pesakit untuk melawan kanser. Virus ini biasanya direkayasa untuk selamat, tetapi jika masih aktif mereplikasi dalam pesakit mereka berpotensi menyebabkan kanser. Penyakit awal vektor retroviral generasi pertama dikaitkan dengan leukemia, tetapi risiko itu telah dibawa ke hampir-sifar dengan lentiviruses generasi ketiga. Sebagai langkah berjaga-jaga, agensi-agensi seperti FDA memerlukan ujian untuk semua sel yang diubah oleh vektor lentiviral untuk memastikan tiada virus yang mempunyai replikasi yang kompeten.

Ujian pesat yang dibangunkan oleh DiGiusto dan rakan sekerja mencari penanda sampul virus dalam sampel sel-sel kejuruteraan yang tidak sepatutnya berada di sana jika tidak ada penularan virus yang hadir. Salah satu kelebihannya ialah ini boleh dilakukan di makmal apabila budaya baru disiapkan dengan beberapa reagen molekul dan seseorang bekerja selama beberapa jam. Prosedur piawai yang diperlukan oleh FDA menunggu 3-4 minggu untuk memeriksa apakah kebudayaan viral berkembang, dan sampel perlu dibekukan dan dihantar ke tapak uji luar.

"Saya fikir dengan amalan saintifik yang baik dan kakitangan teknikal yang baik, ini boleh ditubuhkan di makmal orang secara umum, " kata DiGiusto. "Kami menerbitkan karya kami supaya orang ramai dalam ujian peringkat awal dapat mengakses ujian yang sangat berkelayakan."

Cabaran untuk membuat ujian pesat adalah untuk memastikan bahawa ujian mempunyai kekhususan dan kepekaan terhadap penanda virus. Positif palsu masih mungkin, tetapi hanya untuk kira-kira 1 dalam 100 sampel, dan mereka kemudiannya boleh disahkan dengan menjalankan sampel melalui prosedur standard. Kumpulan DiGiusto telah bekerjasama dengan Stanford Medicine's Crystal Mackall, ahli imunoterapi kanser, dan menggunakan ujian cepat dalam penyiasatan klinikal fasa 1. Prosedur ini juga boleh membantu di kawasan-kawasan lain di mana pengubahsuaian virus diperlukan, dan penggunaannya juga diterokai.

iklan



Sumber Cerita:

Bahan yang disediakan oleh Cell Press . Nota: Kandungan mungkin diedit untuk gaya dan panjang.


Rujukan jurnal :

  1. Lindsey M. Skrdlant, Randall J. Armstrong, Brett M. Keidaisch, Mario F. Lorente, David L. DiGiusto. Pengesanan Replication Lentivirus yang Komprehensif Menggunakan qPCR Assay untuk VSV-G . Terapi Molekul - Kaedah & Pembangunan Klinikal, 2017; DOI: 10.1016 / j.omtm.2017.09.001